蛹虫草人工优质高产栽培技术研究

本试验通过对四个人工分离蛹虫草品种的菌丝体生长情况、子实体产量进行对比分析，结果显示：沈阳人工分离种（S）为优质品种，武汉（W）、河南（H）、北京（B）种为淘汰种。以大米加4个蚕蛹为基质的培养基子实体生物学效率最高；液体菌种生长周期短，生物学效率较高。     

淡紫拟青霉发酵滤液对大豆胞囊线虫趋化性的影响

 实验室条件下,研究了大豆胞囊线虫幼虫对大豆根和根浸出液的趋化性以及淡紫拟青霉代谢产物对其趋化性的影响。结果表明,大豆胞囊线虫二龄幼虫(J₂)对大豆根存在着一定的趋化性,而淡紫拟青霉发酵滤液对J₂存在明显的驱避性。在根浸出液、真菌滤液及其混合液剂处理下,大豆胞囊线虫J₂在WA平板上靠近处理液的0~1cm区间中分布率存在极显著差异(P <0.0 1),而加样时间(液剂与线虫同时放置或提前2 4h处理)对其分布率没有显著影响。大豆幼根蘸取滤液后对线虫J₂在该区间的分布与不经处理的幼根差异显著(P <0.0 5),证明淡紫拟青霉发酵滤液可以明显地降低线虫与大豆根的亲和力,并强烈抑制线虫对大豆根的侵染。     

蛹虫草CmKexin基因克隆和菌丝体中表达检测

为了探讨蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin-like protease)的表达特性,以真菌蛹虫草菌丝体为研究对象,通过RT-PCR获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列,并进行序列分析。应用Northern杂交和Real-time PCR方法,检测蓝光照射后蛹虫草菌丝体中CmKexin基因的转录情况。结果获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列。对翻译蛋白质产物CmKexin进行生物信息学分析,表明该蛋白质含1个属蛋白转化酶的肽酶S8家族功能域(143~429)和1个前体蛋白转化酶P功能域(514~600),符合真菌类枯草杆菌蛋白酶的特征。蛹虫草菌丝体在黑暗预培养4 d后再蓝光照射,Northern Blotting和Real-time PCR检测均可得到相同的结果,即在持续的蓝光照射48~50 h时,出现CmKexin基因的瞬时大量转录。而其他时间内均未检测到该基因的大量转录。试验结果将为蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶的利用提供理论依据。     

滇中蛹虫草居群生物学及其生态学习性研究

通过对滇中地区昆明西山、昆明野鸭湖、嵩明大哨和楚雄紫溪山分布的蛹虫草居群，进行调查和采样，调查分析了蛹虫草的生境，比较研究了蛹虫草不同居群有性型及无性型形态差异，对蛹虫草无性型的产孢结构进行光学显微镜和扫描电镜观察研究。研究发现，蛹虫草子囊壳着生方式及其大小、子囊大小、无性型，随生境不同而发生差异。在云南松常绿阔叶混交林下的子囊壳及子囊较大，分离得到的无性型以拟青霉型（Paecilomyces－type）产孢结构占优势；在华山松林和田埂草丛生境中的子囊壳及其子囊较小，分离得到的无性型以轮枝孢型（Verticillium－type）产孢结构占优势。     

Screening of field performance of entomopathogenic fungi and nematodes against cabbage root flies (Delia radicum l. and d. floralis (fall.); Diptera,Anthomyiidae)

Finnish isolates of Beauveria bassiana (8 isolates), Metarhizium anisopliae (7), Tolypocladium sp. (2), Paecilomyces farinosus (2), P. fumosoroseus (1), Steinernema feltiae (3) and Bacillus thuringiensis ('Muscabac') were tested for efficacy against mixed populations of Delia radicum and D. floralis under field conditions in 1986–90. All pathogens were applied preventatively, the fungi as aqueous conidial or mycelial suspensions, dry conidia or dry mycelial powder. In only two of the nine experiments did B. bassiana or M. anisopliae give some control. In 1986, B. bassiana SF85–2 and Tolypocladium sp. SF85–4 (both at rate 1.2 x 10⁹ conidia plant‐ 1), and ‘Muscabac’ (25 g 1^?1, 1 dl plant^?1) reduced the number of pupae by 80%, 60% and 50%, respectively, as compared with untreated and chemical (isophenphos) controls. In 1990, M. anisopliae SF86–39 at rate 1.6 x 10⁹conidia plant^?1 and 1.5 x 10⁸ CFU plant^?1 and S. feltiae SFS‐22 (35000 plant^?1), increased the yield of cauliflower 2.2, 1.8, and 2.3‐fold, respectively, as compared with the untreated control, but these yields were only 19%, 15% and 19% of those of the chemical (diazinon) control. Paecilomyces isolates were ineffective in the 1986 experiment in which they were included. Our results suggest that it is difficult to find efficient control agents among the fungal and nematode species tested for use as biopesticides against cabbage root flies, but that the potential of M. anisopliae against these pests deserves further study.     

淡紫拟青霉对尖孢镰刀菌的拮抗作用与机制分析

研究表明淡紫拟青霉次生代谢物质对尖胞镰刀菌的孢子萌发与菌落生长有明显的抑制作用.淡紫拟青霉与镰刀菌活体间存在明显的营养竞争作用;淡紫拟青霉菌能产生细胞壁降解酶和蛋白或多糖性质的拮抗性物质;此活性物质存在于胞内和胞外,胞外物质和胞内提取液-1对尖胞镰刀菌孢子生成的抑制率在90%以上,粗蛋白提取液和粗多糖提取液的抑制率在73%左右,丙酮提取液抑制率最低,仅为25.42%;淡紫拟青霉抑菌活性物质主要存在于水相中;活性物质对温度耐受力较差,100℃或80℃处理30 min,基本失去活性.     

蛹虫草5个选育菌株的品比试验

采用加富PDA培养基对保藏的5个蛹虫草菌株进行菌丝生长速度和形态比较．并采用加富米饭培养基进行栽培性能比较．筛选出子座健壮、产量高、生产周期短、适合在南方地区春夏季节栽培的蛹虫草菌株CS—7。     

竹织叶野螟Algedonia coclesalis Walker越冬幼虫的真菌病

粉质拟青霉Paecilomyces farinosus (Dicks.ex.Fr.)Brown et Smith是竹织叶野螟越冬幼虫的重要病原菌,林间自然发病率为23.08％～42.84％。用5.5×10~6/ml孢子悬液感染越冬幼虫,死亡率达91.7％。在24～26℃下,病程约10～14d。林间罹病虫尸上,可见粉质拟青霉被寄生黑孢壳Melanospora parasitica Tulasne寄生。本文还从病原菌的生理性质及侵染环境的角度,讨论了疾病的流行条件和病原菌利用的前景。     

二斑栗实象生活史观察及粉拟青霉菌防治试验

二斑栗实象在云南玉溪市红塔区、峨山县1a发生1代，以幼虫在土壤中越冬，10月中旬至11月下旬是防治地下幼虫的最佳时期。6月中旬成虫羽化高峰期是防治成虫的最佳时间。用粉拟青霉菌防治地下幼虫药效达86．9％，树冠成虫防治药效为64．3％。地下幼虫和树冠成虫防治的最佳剂量均为22．5kg／hm^2。喷施粉拟青霉菌最好选择雨后晴天无风的早晨和傍晚，防治地下幼虫喷药后应立即进行翻挖。     

粉拟青霉菌株的筛选

从冬季自然感病的马尾松毛虫上分离到的粉拟青霉，经回接试验确证为病原菌；在低温下其对原始寄主有较高毒力，经初步筛选拟Ｆ９００２菌株为优良株系。